Giới thiệu:
Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase là một polymerase được biến đổi với hoạt động exonuclease 3′→5′ (hiệu đính) cho thấy độ trung thực được tăng cường hơn 100 lần so với polymerase Taq loại hoang dã, được đo bằng giải trình tự thời gian thực phân tử đơn (SMRT). Biến đổi hóa học của polymerase cho phép PCR khởi động nóng cải thiện độ đặc hiệu và độ chính xác, giảm thiểu việc mồi sai và kéo dài từ các mồi không được ủ đặc hiệu và các mồi-dimer.
Phù hợp trong các ứng dụng đòi hỏi PCR độ trung thực cao, chẳng hạn như giải trình tự hoặc nhân bản. Ngoài ra, khả năng xử lý được tăng cường cho phép khuếch đại tầm xa lên đến 12 kb từ DNA bộ gen và 24 kb từ DNA Lambda. Khả năng chịu đựng GC tăng cường cho phép khuếch đại mạnh mẽ các amplicon khó với hàm lượng GC dao động từ 30-79% khi kết hợp với Enhancer giàu GC 10x (xem hình bên dưới). Khả năng ghép kênh vượt trội đảm bảo khuếch đại đồng đều nhiều loại amplicon khác nhau (xem hình bên dưới).
Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase được thiết kế để kết hợp hiệu quả các dUTP và rất phù hợp để khuếch đại DNA đã xử lý bằng bisulfit (giải trình tự bisulfit), DNA bị hư hỏng (ví dụ: mẫu FFPE) hoặc để ngăn ngừa nhiễm bẩn kéo dài (khi sử dụng với dUTP và UNG ).
Ngoài ra, Solis Hot Start HiFi Polymerase và toàn bộ bộ sản phẩm có thể ổn định ở nhiệt độ phòng trong tối đa 1 tháng do sử dụng Stability TAG – công nghệ ổn định polypeptide độc quyền và được cấp bằng sáng chế của Solis BioDyne được tích hợp vào enzyme, cho phép vận chuyển ở nhiệt độ môi trường thân thiện với môi trường [1]. Độ ổn định ở nhiệt độ phòng cũng mang lại sự tiện lợi tối đa, cho phép thiết lập phản ứng mà không cần đá ở nhiệt độ phòng.
[1] Kahre, O. et al., Các thành phần để tăng cường độ ổn định và hoạt động của polypeptide, và các phương pháp liên quan, EP2501716B1 (2015) và US9321999B2 (2016)
Ứng dụng
- PCR độ trung thực cao (chuẩn bị thư viện giải trình tự, nhân bản, biểu hiện protein, đột biến định hướng vị trí, v.v.)
- PCR tầm xa và quy trình làm việc đầy thử thách (lên đến 12 kb gDNA)
- Sự khuếch đại của các mẫu giàu GC
- Quy trình làm việc sử dụng mẫu DNA chứa uracil hoặc yêu cầu kết hợp dUTP – giải trình tự bisulfit, DNA bị hư hỏng (mẫu FFPE), ngăn ngừa nhiễm chéo kết hợp với UNG.
- Các ứng dụng yêu cầu khả năng ghép kênh cao
- Phiên bản không chứa Glycerol có sẵn theo yêu cầu cho các ứng dụng đông khô
Thông số:
- Loại mẫu: DNA
- Định dạng sản phẩm : Bộ thuốc thử
- Khởi động nóng : Có, hóa chất (kích hoạt trong 12–15 phút)
- Độ trung thực : >100 lần so với Taq polymerase
- Loại phát hiện: phân tích điểm cuối
- Kích thước Amplicon: mẫu phức hợp lên đến 12 kb (gDNA của người), DNA phức tạp thấp 24 kb
- Mục tiêu: 1-18+
Thành phần:
Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase (1 U/µl) trong dung dịch đệm pha loãng enzyme
Bộ đệm phản ứng HiFi 5x với 10 mM MgCl2 (2 mM ở nồng độ 1x)
Chất tăng cường giàu GC 10x như một chất phụ gia giúp khuếch đại các khuôn mẫu khó (ví dụ: khuôn mẫu DNA giàu GC)
