Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase Kit

Giới thiệu:

Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase là một polymerase đã được biến đổi với hoạt tính 3′→5′ exonuclease (sửa lỗi/proofreading), chứng minh độ trung thực được tăng cường hơn 100 lần so với Taq polymerase dạng tự nhiên (wild-type), được đo lường bằng phương pháp giải trình tự thời gian thực phân tử đơn (SMRT). Việc biến đổi hóa học của polymerase cho phép thực hiện PCR hot-start (khởi động nóng) giúp cải thiện độ đặc hiệu và độ chính xác, giảm thiểu việc bắt cặp mồi sai (mispriming) và sự kéo dài từ các mồi bắt cặp không đặc hiệu và primer-dimers.

Sản phẩm phù hợp cho các ứng dụng yêu cầu PCR có độ trung thực cao, chẳng hạn như giải trình tự hoặc tạo dòng (cloning). Ngoài ra, khả năng xử lý mạch (processivity) được tăng cường cho phép khuếch đại đoạn dài lên đến 12 kb từ DNA hệ gen và 24 kb từ DNA Lambda. Khả năng chịu GC (GC tolerance) gia tăng cho phép khuếch đại mạnh mẽ các sản phẩm (amplicons) khó với hàm lượng GC dao động từ 30-79% khi kết hợp với chất tăng cường 10x GC-rich Enhancer. Khả năng đa mồi (multiplexing) vượt trội đảm bảo khuếch đại đồng đều một loạt các sản phẩm đa dạng.

Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase được thiết kế để tích hợp hiệu quả dUTP và rất phù hợp để khuếch đại DNA đã xử lý bisulfite (giải trình tự bisulfite), DNA bị hư hỏng (ví dụ: mẫu FFPE) hoặc để ngăn ngừa nhiễm chéo (khi sử dụng với dUTP và UNG).

Ngoài ra, Solis Hot Start HiFi Polymerase và toàn bộ bộ kit ổn định ở nhiệt độ phòng trong tối đa 1 tháng nhờ sử dụng Stability TAG – công nghệ ổn định polypeptide độc quyền và đã được cấp bằng sáng chế của Solis BioDyne được tích hợp vào enzyme, cho phép vận chuyển ở nhiệt độ thường thân thiện với môi trường [1]. Sự ổn định ở nhiệt độ phòng cũng mang lại sự tiện lợi tối đa, cho phép thiết lập các phản ứng ở nhiệt độ phòng mà không cần đá.

[1] Kahre, O. et al., Compositions for increasing polypeptide stability and activity, and related methods, EP2501716B1 (2015) and US9321999B2 (2016)

Thông số:

• Loại mẫu: DNA

• Dạng sản phẩm: Bộ kit hóa chất (Reagent kit)

• Hot start: Có, hóa học (kích hoạt 12–15 phút)

• Độ trung thực: >100 lần so với Taq polymerase

• Kiểu phát hiện: Phân tích điểm cuối (end-point analysis)

• Đầu sản phẩm (Overhang): Đầu bằng (Blunt)

• Kích thước sản phẩm: Lên tới 12 kb với mẫu phức tạp (gDNA người), 24 kb với DNA độ phức tạp thấp

• Số lượng mục tiêu: 1-18+

Thành phần hỗn hợp:

Solis Hot Start HiFi DNA Polymerase (1 U/µl) trong dung dịch đệm pha loãng enzyme

Bộ đệm phản ứng HiFi 5x với 10 mM MgCl2 (2 mM ở nồng độ 1x)

Chất tăng cường giàu GC gấp 10 lần như một chất phụ gia giúp khuếch đại các khuôn mẫu khó (ví dụ: khuôn mẫu DNA giàu GC)

Ứng dụng:

• PCR độ trung thực cao (High-fidelity PCR): Chuẩn bị thư viện giải trình tự, tạo dòng (cloning), biểu hiện protein, gây đột biến điểm định hướng (site direct mutagenesis), v.v.

• PCR đoạn dài và các quy trình khó (lên đến 12 kb từ gDNA).

• Khuếch đại các khuôn mẫu giàu GC (GC-rich templates).

• Các quy trình sử dụng khuôn DNA chứa uracil hoặc yêu cầu tích hợp dUTP – giải trình tự bisulfite, DNA bị hư hỏng (mẫu FFPE), ngăn ngừa nhiễm chéo khi kết hợp với UNG.

• Các ứng dụng yêu cầu khả năng đa mồi (multiplex) cao.

• Có phiên bản không chứa Glycerol (Glycerol-free) theo yêu cầu cho các ứng dụng đông khô (freeze-drying).

Bảo quản & vận chuyển: